作者: Li S, Zhou T, Li C, Dai Z, Che D, Yao Y, et al.
期刊: PLoS One
发表日期: 2014年5月13日
DOI: 10.1371/journal.pone.0097330
研究背景
近年来,脂肪酸代谢在癌症细胞功能中的作用引起了广泛关注。研究发现,油酸可能通过AMPK途径影响癌细胞的代谢行为。AMPK是细胞能量状态的高度保守传感器,可以在能量耗竭时激活,促进代谢改变以维持细胞增殖和生存。
材料与方法
化学试剂:
油酸 (Oleic Acid)
CAS号: 112-80-1
无脂肪酸的牛血清白蛋白 (Fatty Acid-Free Bovine Serum Albumin)
CAS号: 9048-46-8
AICAR (5-Aminoimidazole-4-carboxamide ribonucleotide)
CAS号: 2627-69-2
Compound C (Dorsomorphin)
CAS号: 866405-64-3
BrdU (5-Bromo-2'-deoxyuridine)
CAS号: 59-14-3
ATP (Adenosine Triphosphate)
CAS号: 56-65-5
油红O (Oil Red O)
CAS号: 1320-06-5
主要实验方法:
细胞系: HGC-27, AGS, SGC7901, BGC823人胃癌细胞系和MDA-MB-231, MCF-7人乳腺癌细胞系。
细胞活力检测: 使用MTT法测定。
BrdU掺入检测: 通过测量BrdU掺入量评估细胞增殖。
迁移检测: 使用Transwell小室检测细胞迁移能力。
Western Blot: 检测蛋白表达水平。
siRNA转染: 干扰AMPKα1表达,验证其在油酸作用中的角色。
油红O染色和甘油三酯检测: 测量细胞内脂滴和甘油三酯含量。
氧气消耗测定: 通过克拉克型氧电极测定细胞的氧气消耗率。
ATP检测: 使用ATPlite试剂盒测量细胞内ATP水平。
主要发现
高转移性癌细胞在油酸存在下展示出更高的迁移能力和存活率。
油酸的代谢依赖于AMPK信号通路的激活。
AMPKα1的敲除显著抑制了油酸引起的癌细胞迁移和增殖。
结论
研究表明,油酸通过AMPK依赖的途径促进高转移性胃癌和乳腺癌细胞的代谢和迁移,这为理解脂肪酸在癌症中的作用提供了新的视角。